Clostridium difficile Undersøgelse for


	1)	Indikation
	2)	Rekvisition
	3)	Prøvemateriale
	4)	Prøvemedie/prøvetagning
	5)	Transport/holdbarhed
	6)	Svartid
	7)	Analyse
	8)	Analysesvar samt tolkning
	9)	Princip for analysen
	10)	Konfirmation
	11)	Vejledning/rådgivning
	12)	Sensitivitet/specificitet
	13)	Kvalitetskontrol
	14)	Måleområde
	15)	CE mærkning/akkreditering
	16)	Andre oplysninger
	17)	Baggrund
	18)	Litteratur

Indikation

Analysen anbefales på mistanke om diarré forårsaget af toxin-producerende Clostridioides difficile (kaldet Clostridium difficile). Sædvanligvis er der ikke indikation for analysen, hvis patienten har formet afføring, ligesom der ikke er indikation for kontrolanalyser efter endt behandling, såfremt patienten ikke har symptomer.

2)	Rekvisition WebReq: Clostridium difficile Undersøgelse for Best/Ord: 59120 Undersøgelse: Clostridium difficile Undersøgelse for Materiale: Podning Lokalisation: Rektum

3)	Prøvemateriale Podning fra rektum.

Prøvemedie/prøvetagning

Rektalpodningen skal tages med en fecalSwab (orange låg).

Tag podning med podepinden fra endetarmen. (Podepinden må ikke føres mere end 2 cm op i endetarmen). Røret skal endelig ikke fyldes op med fæces
Skru låget af plastglasset og stik podepinden ned i transportmediet med spidsen først
Knæk podepinden ved den farvede linje, lad podepinden blive i røret, skru låget på, så det er tæt
Sæt stregkodeetiketten fra prøvetagningsblanketten på langs af røret

5)	Transport/holdbarhed Prøven skal transporteres til Klinisk Mikrobiologisk Afdeling umiddelbart efter prøvetagning og skal være modtaget senest 3 døgn efter prøvetagning. Inden transport opbevares prøve ved 4° C.

6)	Svartid Analysen udføres alle dage med forventet svar den efterfølgende dag.

7)	Analyse Toxigen C. difficile DNA PCR

8)	Analysesvar samt tolkning Positiv: Toxigen C. difficile: Påvist Negativ: Toxigen C. difficile: Ikke påvist

9)	Princip for analysen Realtime Nukleinsyre Amplifikation (Polymerase kædereaktion, PCR). Opformerede PCR-produkter identificeres med specifikke prober (5'-nuclease-assay).

10)	Konfirmation Analysen er internt konfirmeret.

11)	Vejledning/rådgivning Vagthavende læge, Klinisk Mikrobiologisk Afdeling, Hospital tlf.: 3862 6443 el. Praksis tlf.: 3862 6445

12)	Sensitivitet/specificitet Sammenlignet med dyrkning har analysen en sensitivitet på 99,0 %. Sammenlignet med dyrkning har analysen en specificitet på 97,4 %.

13)

Kvalitetskontrol

Intern QC:

Negative kontroller, samt positiv C. difficile kontrol (tcdB+, cdtA+) inkluderes i hver analysekørsel. Analysekomponenterne er fremstillet under kontrollerede betingelser. Kontrol virus tilsættes hver prøve for at monitorere prøveekstraktion samt amplifikation.

Ekstern QC:

Analysen indgår i Laboratoriets program for ekstern kvalitetskontrol.

14)	Måleområde Analysen besvares kvalitativt.

15)	CE mærkning/akkreditering Nej, analysen er udviklet og valideret internt på Klinisk Mikrobiologisk Afdeling 445, Hvidovre Hospital.

16)

Andre oplysninger

Det anbefales kun at sende én prøve fra hver diarre-patient, idet der har vist sig stor overensstemmelse (98,1 %) mellem prøver taget fra samme patient indenfor et døgn. Det kan være relevant at gentage analysen, hvis der er fortsat klinisk mistanke trods et negativt analysesvar.

17)

Baggrund

Toxin-producerende Clostridioides difficile er i Danmark den hyppigste årsag til hospitalserhvervet diarré. Virulens forårsages af de to toxiner, toxin A, kodet af genet tcdA, og toxin B, kodet af genet tcdB. Nogle toxinproducerende isolater producerer endvidere et binært toxin, kodet af generne cdtA og cdtB.

C. difficile PCR-analysen påviser tilstedeværelse af toksin B (kodet af genet tcdB) og binært toksin (kodet af genet cdtA).

18)

Litteratur

AM. Hoegh, JB. Nielsen, A. Lester, A. Friis-Møller, K. Schønning. A multiplex, internally controlled real-time PCR assay for detection of toxigenic Clostridium difficile and identification of hypervirulent strain 027/ST-1. Eur. J. Clin. Microbol. Infect. Dis. 31:1073-1079 (2012); pmid 21938539.

18.09.2023