Denguevirus antigen- og antistofundersøgelse


	1)	Indikation
	2)	Rekvisition
	3)	Prøvemateriale
	4)	Prøvemedie/prøvetagning
	5)	Transport/holdbarhed
	6)	Svartid
	7)	Analyse
	8)	Analysesvar samt tolkning
	9)	Princip for analysen
	10)	Konfirmation
	11)	Vejledning/rådgivning
	12)	Sensitivitet/specificitet
	13)	Kvalitetskontrol
	14)	Måleområde
	15)	CE mærkning/akkreditering
	16)	Andre oplysninger
	17)	Baggrund
	18)	Litteratur

1)	Indikation Klinisk mistanke og relevant rejseanamnese mellem 35° nord og 35° syd for ækvator, svarende til udbredelsen af vektoren (Aedes spp.)

2)	Rekvisition WebReq: Udbydes ikke til praksis Best/Ord: DNK35279 P—Dengue virus antigen og antistof; arb.k. (liste; proc.)

3)	Prøvemateriale Blod uden tilsætning eller plasma, 3-5 mL. Mindste prøvevolumen: 500 µL.

4)	Prøvemedie/prøvetagning Vacuette gelglas gold3.5

5)	Transport/holdbarhed Prøven skal transporteres til Klinisk Mikrobiologisk Afdeling (KMA) umiddelbart efter prøvetagning. Prøven er holdbar i 2 dage ved 2-8 °C eller 3 dage efter separation af serum og mindst 3 måneder ved - 20 °C.

6)	Svartid Analysen foretages alle hverdage. Maksimale svartid: under 4 dage.

7)	Analyse BioMérieux VIDAS Dengue NS1 Ag (DEAG), Anti-Dengue IgM (DENM) og Anti-Dengue IgG (DENG). Analysen påviser Dengue-antigen, som er et konserveret denguevirus-glykoprotein kaldet non-strukturelt protein 1 (NS1 Ag), og human IgM- og IgG-antistoffer mod alle 4 dengueserotyper.

Analysesvar samt tolkning

Undersøgelsens navn: Denguevirus-antigen (NS1 Ag) og antistofundersøgelse (IgM og IgG).

Besvarelse:

Dengue NS1 Ag:

Positiv: Denguevirus-antigen er positiv og større end eller lig med indeks 1,0
Negativ: Denguevirus-antigen er ikke påvist

Dengue IgM og IgG antistoffer:

Positiv: IgM-antistoffer er positive og større end eller lig med indeks 1,0
Positiv: IgG-antistoffer er positive og større end eller lig med indeks 1,0
Negativ: IgM-antistoffer er ikke påvist
Negativ: IgG-antistoffer er ikke påvist

Analyseresultat tolkes således:

NS1 Ag*	IgM	IgG	Tolkning**
positiv	negativ	negativ	Forenelig med akut infektion
positiv	positiv	negativ
positiv	positiv	positiv
negativ	positiv	negativ	Forenelig med sen akut infektion
negativ	positiv	positiv	Forenelig med sen akut infektion
negativ	negativ	positiv	Forenelig med overstået infektion
negativ	negativ	negativ	Ingen tegn til akut eller tidligere infektion
*Dengue NS1 Ag påviser NS1-antigen mindre end 7 dage efter feberdebut
**Tidspunktet for fremkomst og varighed af antistoffer afhænger af om infektionen er primær eller sekundær. Dengue IgM kan påvises fra dag 4 ved infektion. Under primær infektion kan IgM-antistof detekteres tidligt efter symptomernes indtræden og forbliver positiv i 2-3 måneder. Dengue IgG fremkommer få dage efter IgM og forbliver i årevis. Under en sekundær infektion fremkommer Dengue IgG tidligere, og IgM har en kinetik, som er tættere på en primær infektion, men på et lavere niveau. Antistofkrydsreaktivitet med andre flavivirus forekommer. Uændret isoleret IgM reaktivitet ved gentagelse efter 2-3 uger tyder på uspecifik reaktivitet.

9)	Princip for analysen Enzyme Linked Fluorescent Assay (ELFA) er en enzymbundet fluorescensanalyse. Analyseprincippet kombinerer en totrins-enzym-immunanalysemetode (sandwich) med en afsluttende fluorescensdetektion.

10)	Konfirmation Analysen konfirmeres ikke rutinemæssigt.

11)

Vejledning/rådgivning

Falsk-positive svar kan forekomme ved forkert opbevaring/håndtering af prøvemateriale.

Falsk-negative svar kan forekomme ved nylig infektion.

Ved vedvarende symptomer og initial negativ test anbefales fornyet testning 3-4 dage efter første prøve.

Rekvirenten kan henvende sig til vagthavende læge på KMA.

12)

Sensitivitet/specificitet

Ved validering af analysen (n = 56) er der sammenlignet med tidligere brugte SD Dengue Duo.

NS1 Ag VIDAS vs. NS1 Ag Dengue Duo: Sensitivitet 100 % (CI = 78.2 - 100); Specificitet 97,6 % (CI = 87.1 - 99.9).

En overensstemmelsesprocent for NS1 Ag mellem de to test på 93,6 % er desuden fundet ved intern validering.

13)	Kvalitetskontrol Intern QC: Der anvendes analysekontroller som beskrevet af leverandøren. Alle analyser har intern kontrol. Ekstern QC: Analysen indgår i Laboratoriets program for ekstern kvalitetskontrol.

14)	Måleområde Ingen

15)	CE mærkning/akkreditering Ja

16)	Andre oplysninger Ingen

17)

Baggrund

Denguevirus tilhører familien Flaviviridae, og den overføres til mennesker af Aedes-myg.

Denguevirus er opdelt i fire serotyper. Klinisk diagnose af denguevirusinfektion afhænger primært af ikke-specifikke symptomer (hovedpine, ledsmerter, myalgi, kvalme, opkast og trombocytopeni).

Efter bid af inficerede Aedes-myg spredes virus i lokale lymfeknuder til monocytter og makrofager i blodet og andre væv. Denguevirus forefindes i blodet i 5- 7 dage. Inkubationstiden til symptomdebut er 4-7 dage, og patienten debuterer typisk med feber, frontal hovedpine, retroorbitale smerter og influenzalignende symptomer. Herefter følger typisk muskel- og ledsmerter (break-bone fever) og udslæt inden for 3-4 dage. Knoglemarvssuppression ses inden for 4-5 dage, værst på 7. dagen efter symptomdebut. Sygdommen er selvlimiterende og ofte mild hos de fleste.

Reinfektion med en anden serotype kan sjældent give anledning til svær sygdom med hæmorrhagisk feber og denguechoktilstand. Vertikal transmission op til 5 uger før fødsel kan medføre hæmorrhagisk feber hos barnet, mens effekten af tidligere smitte i graviditeten ikke er afklaret.

Der findes en levende, svækket tetravalent denguevaccine (Qdenga), godkendt til personer over fire år. Vaccinen gives i to doser med tre måneders interval og beskytter mod alle fire dengue virusserotyper. Hyppige, milde bivirkninger er hovedpine og smerter på injektionsstedet.

18)

Litteratur

Package inserts for BioMérieux Dengue VIDAS
Somlor S. Evaluation of VIDAS® Diagnostic Assay Prototypes Detecting Dengue Virus NS1 Antigen and Anti-Dengue Virus IgM and IgG Antibodies. Diagnostics (Basel). 2021 Jul 7;11(7):1228
Mandell, Douglas and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 9th edi, 2019

28.09.2026