Giemsa farvning

  
1) Formål
2) Målgruppe og anvendelsesområde
3) Princip og metode
4) Fremgangsmåde
5) Mikroskopi, vurdering og svarafgivelse
6) Lynvejledning
7) Reagens, materiale og apparatur
8) Prøvemateriale
9) Sikkerhed
10) Referencer
  
1) 
Formål

At synliggøre malariaparasitter i kapillærblod.


Giemsa farvemetoden kan desuden anvendes til farvning for Babesia sp. Pneumocystis carinii, microfilarier, trypanosomer og Leishmania sp.
 
2) 
Målgruppe og anvendelsesområde

At sikre korrekt beskrivelse af arbejdsgang for bioanalytikere og læger.


 
3) 
Princip og metode

2 ufixerede dråbepræparater og 2 fixerede udstrygningspræparater farves med Giemsa-opløsning.


 
4) 
Fremgangsmåde

Fremstilling af farvevæske:

2 ml Giemsa-opløsning afpipetteres i et 50 ml måleglas, efterfyldes med fosfatbuffer til et samlet volumen på 50 ml (4% Giemsa).  

I tilfælde, hvor det skønnes nødvendigt med en mere koncentreret farvning, kan anvendes en 8% Giemsa opløsning, dvs. der tilsættes 4 ml Giemsa i stedet for 2 ml. 


Forbehandling af præparater:

De 2 udstrygningspræparater fixeres ved at dryppe methanol på udstrygningsområdet, anbringe objektglasset på højkant og lade det lufttørre. 

OBS! Det er vigtigt, at udstrygningspræparatet er helt tørt før farvning, da det ellers forårsager en svag fixering af dråbepræparatet og dermed vanskeliggør mikroskoperingen.


Farvning

  1. 2 fixerede udstrygningspræparater og 2 ufixerede dråbepræparater anbringes i farvebeholderen

  2. Farvevæsken påfyldes forsigtigt, op til det hvide skrivefelt på glassene. Farves i 30 minutter

  3. Præparaterne tages op og skylles forsigtigt i plastbæger, hvori der er fyldt rent vand

  4. Aftør bagsiden af præparatet med filtrerpapir

 

Præparaterne lufttørres.

 

NB: Farvevæsken må kun anvendes én gang, hvis præparaterne er positive, da parasitter kan overføres til næste præparat. Hvis præparaterne er negative, kan farvevæsken bruges 1 dag.

 

Efter brug bortskaffes farvevæsken i plastdunk mærket "Giemsaaffald". Se relevant arbejdspladsbrugsanvisning.


 
5) 
Mikroskopi, vurdering og svarafgivelse

Se særskilt instruks: mikroskopi malaria.

 
6) 
Lynvejledning


 
7) 
Reagens, materiale og apparatur

  • Methanol Merck® (B+B) i sprøjteflaske
  • 1/15M Fosfatbuffer pH 7,2 (SSI Diagnostika)
  • Konc. Giemsa-opløsning Merck® (B+B)
  • Måleglas 50 ml
  • Engangs-plastpipette 1 ml
  • Stinkskab med rindende vand
  • Farvecylinder 50 ml
  • Plastbæger
  • Stopur
  • Pincet
  • Filtrerpapir

 
8) 
Prøvemateriale

2 udstrygningspræparater og 2 dråbepræparater af kapillærblod.

 
9) 
Sikkerhed

Se afdelingens sikkerhedspolitik. Farveprocessen skal foregå i stinkskab. Undgå kontakt med huden og indånding. Se i øvrigt arbejdspladsbrugsanvisninger og bortskaffelsesvejledning for methanol og Giemsa i sikkerhedsmappen.


 
10) 
Referencer

  • Basic laboratory methods in medical parasitology, WHO 1991, s.39

 
 
Læger - Ins..14142 Mikroskopi Malaria
Bilag: 1, Lynvejledning til Giemsa farvning (doc)
Administration - Pol..13996 Sikkerhedspolitik
 
Bilag:
1, Lynvejledning til Giemsa farvning
06.10.2023