Mikroskopi Malaria
| Formål At undersøge blod for tilstedeværelse, mængde (parasitaemigrad), art og fase af malariaparasitter samt evt. Babesia, microfilariae og andre blodparasitter. Ved prøver som er malaria LAMP påvist udføres malaria mikroskopi. Hos patienter som har fået påvist malaria følges parasitaemigraden dagligt ved mikroskopi, indtil der foreligger negativ mikroskopi. Som standard kontrolleres mikroskopi også på dag 7 og 28. |
| Prøvemateriale |
Apparatur
|
| Reagenser og materialer Se instruks Giemsa-farvning. |
| Arbejdsgang ved analysering Præparaterne Giemsa-farves i 30 minutter (se instruks Giemsa-farvning). |
Databehandling og resultatfortolkningDråbepræparater:Undersøges først. Der er 15-20 gange mere blod pr. synsfelt i dråbepræparater end i udstrygnings-præparater, og følsomheden er tilsvarende større. Sensitiviteten ved mikroskopi er i trænede hænder ca. 5 parasitter/µl blod. Mikroskopien indledes med at scanne for mikrofilarier med 10 x objektiv. Præparatet undersøges herefter for malaria-parasitter med 100 x objektiv (olieimmersion), evt. 60 x objektiv. En malariaparasit består af et rødt kromatinkorn (kerne) og et blåt cytoplasma. Ved fund af malariaparasitter undersøges disse nærmere i udstrygningspræparaterne. Et negativt svar kan først afgives, når der ikke er set parasitter i 200 synsfelter ved 100 x objektiv i et præparat af en passende tæthed (>15 leukocytter pr. synsfelt). Er præparatet tyndere øges antallet af mikroskoperede synsfelter. Der regnes med et tidsforbrug på mindst 3 sekunder pr. synsfelt, (dvs. minimum 5 min.).
Udstrygningspræparater Udstryget undersøges kun ved fund af malariaparasitter i dråbepræparatet eller, hvis dråbepræparatet er af for dårligt kvalitet til, at en diagnostisk undersøgelse kan udføres. Undersøges med 100 x objektiv (olieimmersion), evt. 60 x objektiv. Undersøg præparatet, hvor erytrocytterne ligger side-to-side. Her kan artsidentifikation og vækstfase bedst bestemmes. Se WHO: Basic malaria microscopy og Plasmodium falciparum bench aid, Plasmodium vivax bench aid, Plasmodium ovale bench aid, Plasmodium malariae bench aid og Plasmodium species thick stain bench aid. Se CDC Plasmodium falciparum DPDx, Plasmodium vivax DPDx, Plasmodium ovale DPDx, og Plasmodium malariae DPDx. Parasitaemigraden angives som andelen af erythrocytter, der er inficerede af malariaparasitter i procent (%). Brug tællekammer. Der tælles mindst 1000 erythrocytter, gerne 2000 erythrocytter. Ved lav parasitgrad kan det være nødvendigt at tælle flere erythrocytter. Tæl de aseksuelle stadier, dvs. gametocytter tælles ikke med. Parasitgraden er især vigtig ved P. falciparum, da behandling ændres, hvis parasitgraden er > 2 %. Det er vigtigt, at man flytter øjnene fra synsfeltet, når dette skiftes, ellers er der en tendens til at overestimere parasitgraden.
De Giemsa-farvede udstrygningspræparater bruges også til at finde og identificere andre blodparasitter, f.eks. Babesia sp., Trypanosoma sp. og Leishmania sp.. Disse er i DK sjældne infektioner, men kan forekomme. Hvis mistanke om disse, tilkald speciallæge til vurdering af præparaterne. |
| Kvalitetskontroller Ekstern kvalitets kontrol ved "DEKS prøver Ekstern kvalitetskontrol" og "Besvarelse af DEKS prøver via Neqas" |
| Vedligeholdelse Mikroskoper serviceres af medicoteknisk afdeling. |
| Sikkerhed og risikovurdering |
| Affaldshåndtering |
| Nødprocedurer Kontakt nærmeste leder. |
| Undersøgelsesprincip Til undersøgelse for malaria mikroskopi kræves 2 ufikserede dråbepræparater og 2 methanol fikserede udstrygningspræparater pr. undersøgelse. Præparaterne Giemsa-farves i 30 minutter (se instruks Giemsa-farvning). |
| Medicinsk baggrund for analysen Malaria kan være en livstruende sygdom. |